近日，新乡医学院王天云教授团队在国际权威期刊International Journal of Biological Macromolecules上发表了题为“Effect of CHO cell line constructed with CMAH gene-directed integration on the recombinant protein expression”的研究论文。新乡医学院2018级研究生曹祥祥为该论文第一作者，基础医学院耿少雷博士和王天云教授为共同通讯作者。研究得到了国家自然科学基金、中原科技创新领军人才及河南省科协青年托举人才项目的资助。

该研究揭示了CMAH位点特异性整合显著提高了CHO细胞转基因表达的稳定性并改善重组蛋白的糖基化形式，为CHO细胞系的构建提供了新的策略。近70 %获批上市的重组蛋白药物是由中国仓鼠卵巢（CHO）细胞生产的，但转基因长期表达不稳定。传统的CHO细胞构建是基于外源基因随机整合到CHO基因组中，该方法工作量大、整合效率和转录活性低、且转基因沉默程度高，亟需筛选和鉴定CHO细胞基因组中高效、稳定的整合位点，解决生物制药企业的实际需求。该团队采用CRISPR/Cas9基因编辑技术，用于对CHO细胞基因组中对乙酰神经氨酸羟化酶（CMAH）位点进行特异性整合。与随机整合相比，在CMAH位点的整合，使得细胞呈现出更稳定的EGFP荧光表达水平和更低的异质性，并且所表达的促红细胞生成素（EPO）中产生了更理想的糖基化形式。本研究结果首次揭示了转基因在CMAH位点的特异性整合能够提高转基因表达的长期稳定性，对治疗性糖蛋白的表达具有重要意义，为CHO细胞系的构建提供了一条新的途径。

据了解，International Journal of Biological Macromolecules属于中国科学院一区Top期刊，影响因子为7.7。

（来源：新乡医学院；责编：刘铮）